作為生命科學實驗室的“細胞觀察利器”，尼康TS2倒置顯微鏡憑借其CFI60無限遠光學系統、LED照明模塊及人體工學設計，成為細胞培養、熒光成像等領域的首選設備。本文將從基礎操作到高階功能，系統解析TS2顯微鏡的使用方法。

一、設備結構與核心組件

TS2顯微鏡采用模塊化設計，主要包含以下核心組件：

1.光學系統：CFI60無限遠校正光學系統，支持明場、相差、浮雕反差及落射熒光觀察。

2.照明模塊：高亮度白光LED透射照明（Ts2型號）或LED透射+落射熒光照明（Ts2-FL型號），波長覆蓋385-625nm。

3.載物臺：平板載物臺（170×247mm）或可選機械載物臺（126×78mm行程），兼容35mm/100mm培養皿、微孔板及載玻片。

4.控制面板：前面板集成電源開關、透射/熒光切換按鈕；左側控制透射光亮度，右側控制熒光強度。

5.物鏡轉盤：五孔物鏡轉盤，支持10×、20×、40×等倍率物鏡快速切換。

二、基礎操作流程

1. 開機準備

設備放置：將顯微鏡置于生物安全柜或實驗臺邊緣，確保載物臺處于低位（避免物鏡碰撞）。

電源連接：接入100-240V交流電，打開前面板電源開關，LED指示燈亮起。

物鏡選擇：旋轉物鏡轉盤至4×物鏡（低倍物鏡），避免高倍物鏡直接接觸載玻片。

2. 光源調節

透射光：通過左側旋鈕調節亮度，配合聚光鏡光柵控制光照范圍。

熒光光（Ts2-FL型號）：選擇熒光波長（如488nm激發GFP），通過右側旋鈕調節強度，使用遮光板減少環境光干擾。

3. 載玻片放置

培養皿：使用專用托板（如CS-HP35）固定35mm培養皿，確保細胞層朝上。

微孔板：將96孔板置于機械載物臺，通過X/Y軸旋鈕定位目標孔。

載玻片：用壓片夾固定玻片，調整載物臺使標本對準通光孔中心。

4. 調焦與觀察

低倍鏡（4×/10×）：

側面注視物鏡，緩慢旋轉粗調旋鈕使載物臺上升，直至物鏡接近標本（間距約2mm）。

左眼觀察目鏡，反向旋轉粗調旋鈕下降載物臺，直至出現模糊影像，再微調細調旋鈕至清晰。

高倍鏡（20×/40×）：

在低倍鏡下將目標移至視野中央，切換至高倍物鏡。

僅使用細調旋鈕微調焦距，避免壓碎標本。

5. 相差與浮雕反差觀察

相差觀察：安裝相差物鏡（如10×PH）及預對中相差滑塊，調整聚光鏡高度至75mm（ELWD聚光鏡），獲得高對比度細胞輪廓。

浮雕反差觀察：安裝浮雕反差滑塊（聚光鏡側+目鏡筒側），通過調焦照明實現偽三維成像，適用于厚標本（如iPS細胞球）。

三、高階功能應用

1. 熒光成像

濾光塊選擇：根據熒光標記選擇濾光塊（如FITC濾光塊用于GFP觀測）。

曝光控制：通過右側旋鈕調節LED強度，避免光漂白；使用相機端口連接CCD相機，設置適宜曝光時間。

多色熒光：Ts2-FL型號支持同時安裝3種熒光LED單元，通過濾光塊轉盤切換波長，實現多標記共定位分析。

2. 長時程活細胞監測

環境控制：將顯微鏡置于培養箱內，維持37℃、5% CO?條件。

自動聚焦：搭配尼康NIS-Elements軟件，啟用硬件自動聚焦功能，實現72小時連續成像。

數據管理：通過相機端口實時傳輸圖像至計算機，使用軟件進行時間序列分析。

四、關機與維護

1.關機步驟：

降低載物臺至最低位，切換至4×物鏡。

關閉光源（推拉亮度調節器至暗檔），關閉電源開關。

取下標本，用擦鏡紙清潔物鏡及目鏡。

2.日常維護：

定期檢查LED壽命（通常＞20,000小時），更換老化光源。

使用專用清潔液擦拭機身，避免酒精腐蝕涂層。

存放時覆蓋防塵罩，避免物鏡受潮。

五、常見問題解決

圖像模糊：檢查物鏡是否鎖緊，重新調焦或清潔鏡頭。

熒光信號弱：確認濾光塊匹配熒光波長，增加LED強度或延長曝光時間。

載物臺抖動：檢查機械載物臺鎖緊螺絲是否擰緊，避免外力碰撞。

尼康TS2倒置顯微鏡通過智能化設計與模塊化擴展，為細胞研究提供了高效、精準的解決方案。掌握其操作技巧，可顯著提升實驗效率與數據質量，助力生命科學前沿探索。